Turbo Chemically Competent Cell 使用說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品說(shuō)明：
Turbo 菌株是生長(zhǎng)最快的大腸桿菌菌株。平板上 6.5 小時(shí)可見(jiàn)克隆，營(yíng)養(yǎng)液中搖菌 4-6 小時(shí)可提取質(zhì)粒，缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)，提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量；Turbo 菌株可嚴(yán)格控制 lacl q的表達(dá)，可以克隆毒性基因；fhuA2 突變賦予 Turbo 菌株對(duì)噬菌體 T1 的抗性；lacZΔM15 的存在使 Turbo 可用于藍(lán)、白斑篩選。Turbo 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>5×108 cfu/μg。
產(chǎn)品組成：
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組 分
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Turbo Chemically Competent Cell
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10 × 100 µL
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50× 100 µL
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pUC19（control vector，10pg/μL）
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10μL
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10μL
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* 基因型：F' proA+B+ lacI q ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) Tet S endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
儲(chǔ)存條件：
-80℃±10℃保存6個(gè)月。請(qǐng)勿將本品置于-20℃或液氮中保存。
使用方法：
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃冰箱中取出，置于冰水浴中融化。
2. 將目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）加入到100μL感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。
3. 42℃水浴熱激45秒后，立刻置于冰上，靜置2～3分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
4. 向離心管中加入200μL無(wú)抗LB、TB或SOC培養(yǎng)基，混勻后于220rpm，37℃搖床振蕩復(fù)蘇60分鐘，使轉(zhuǎn)化物表達(dá)抗性基因。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求吸取適量菌液，涂布至相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上，室溫正置10分鐘，待菌液被平板充分吸收后，37℃倒置培養(yǎng)6.5小時(shí)以上。
注意事項(xiàng)：
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目的DNA，不可在冰上放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。
3. 待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后，請(qǐng)勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。
4. 為確保最高效率轉(zhuǎn)化，整個(gè)操作過(guò)程應(yīng)盡量輕柔，并保持冰上操作。
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